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液相色譜儀測(cè)定方法之水產(chǎn)品中呋喃唑酮?dú)?/div>
2013-11-14 [4039]

液相色譜儀測(cè)定方法之水產(chǎn)品中呋喃唑酮?dú)?/span>

杭州森尼歐科學(xué)儀器有限公司為您提供專業(yè)的二手液相色譜儀。
以下文章將為您介紹呋喃唑酮?dú)垳y(cè)定方法,首先我們來(lái)了解下喃唑酮?dú)?/span>


呋喃唑酮為殺菌劑, 具有較廣的抗菌譜, zui敏感菌為大腸桿菌,炭疽桿菌,副傷寒桿,痢疾桿菌,肺炎桿菌,傷寒桿菌對(duì)之亦敏感。主要用于敏感菌所致的細(xì)菌性痢疾,腸炎、霍亂,也可以用于傷寒、副傷寒、賈第鞭毛蟲病、滴蟲病等。與制酸劑等藥物合用可治療幽門螺桿菌所致的胃竇炎。
1.范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了水產(chǎn)品中呋喃唑酮?dú)埩袅康臏y(cè)定方法──液相色譜法。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于水產(chǎn)品可食部分中呋喃唑酮?dú)埩袅康臏y(cè)定。
2.規(guī)范性引用文件
下列文件中的條款通過(guò)本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件,其隨后所有的修改單(不包括勘誤的內(nèi)容)或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn),然而,鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的版本。凡是不注日期的引用文件,其版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。
GB/T6682-1992分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法
3.原理
樣品中呋喃唑酮用二氯甲烷提取,蒸發(fā)濃縮提取液,無(wú)水硫酸鈉去除水分,用正己烷液-液萃取除去脂肪及其它雜質(zhì),離心,取下層清液經(jīng)膜過(guò)濾器后用液相色譜儀分離,紫外檢測(cè)器檢測(cè),外標(biāo)法定量。
4.試劑和材料
4.1乙腈:色譜純。
4.2二氯甲烷:色譜純。
4.3正己烷:分析純,用乙腈飽和。
4.485%磷酸:分析純。
4.5乙腈水溶液:乙腈 水(體積分?jǐn)?shù)為80 20)。
4.6無(wú)水硫酸鈉:分析純;經(jīng)640℃灼燒4.0h后,貯于密閉容器中備用。
4.7無(wú)水硫酸鈉柱:200mm×24mm(id),內(nèi)裝50mm~100mm高的無(wú)水硫酸鈉。
4.8呋喃唑酮標(biāo)準(zhǔn)品:純度≥99.5%。
4.9呋喃唑酮標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液:稱取10.0mg呋喃唑酮,用乙腈水溶液溶解并稀釋定容至50mL棕色容量瓶中,在冰箱中冷藏保存,保存期一個(gè)月。該液1mL相當(dāng)于200μg呋喃唑酮。
4.10試驗(yàn)用水:符合GB/T6682一級(jí)水標(biāo)準(zhǔn)。
5.儀器和設(shè)備
5.1液相色譜儀,配有紫外檢測(cè)器。
5.2高速組織搗碎機(jī)。
5.3旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。
5.3離心機(jī)。
5.4振蕩器。
5.5蒸發(fā)燒瓶,具塞。
5.6刻度離心管。
5.7膜孔濾器:0.45μm。
6.色譜條件
6.1色譜柱:C18柱,250mm×4.6mm(id),粒度5μm。
6.2流動(dòng)相:乙腈 水 磷酸(體積分?jǐn)?shù)為40 60 0.1)。
6.3流速:0.8mL/min。
6.4檢測(cè)波長(zhǎng):365nm。
6.5柱溫:室溫。
6.6進(jìn)樣量:20μL。
7.樣品測(cè)定
7.1試樣制備
取魚、蝦、蟹、鱉等水產(chǎn)品可食部分,切成不大于5mm×5mm×5mm的小塊后混勻,經(jīng)高速組織搗碎機(jī)搗碎即可,充分混勻。
7.2提取
稱取搗碎樣品約10g(至0.01g),加25mL二氯甲烷攪拌分散后浸泡15min,在振蕩器上振蕩5min,提取液經(jīng)無(wú)水硫酸鈉柱濾入蒸發(fā)燒瓶中,殘?jiān)謩e用25mL和15mL二氯甲烷按上述方法各重復(fù)提取一次,再用15mL二氯甲烷沖洗無(wú)水硫酸鈉柱,并采用洗耳球吹出柱中液體,濾液均濾入同一蒸發(fā)燒瓶中,濾液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上在45℃左右水浴下減壓蒸發(fā)去除溶劑,蒸發(fā)速度控制在每秒一滴。
7.3凈化
用1.0mL流動(dòng)相和1.0mL正己烷溶解殘?jiān)⒊浞窒礈煺舭l(fā)燒瓶,將液體移入離心管中,在4000r/min離心5min,用尖嘴吸管移去上層正己烷層,再向離心管中加入1.0mL正己烷,混勻2min,離心,用尖嘴吸管移去上層正己烷層,下層清液經(jīng)0.45μm膜孔濾器過(guò)濾后進(jìn)HPLC分析。
7.4測(cè)定
7.4.1呋喃唑酮標(biāo)準(zhǔn)工作液配制
臨用前,取呋喃唑酮標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,用流動(dòng)相稀釋成濃度為0.01μg/mL~1.00μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作液。
7.4.2液相色譜測(cè)定
根據(jù)樣品液中呋喃唑酮?dú)埩袅壳闆r,選定峰高相近的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和樣品液中呋喃唑酮響應(yīng)值均應(yīng)在儀器檢測(cè)線性范圍內(nèi)。對(duì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和樣品液等體積參插進(jìn)樣進(jìn)行測(cè)定。在上述色譜條件下,呋喃唑酮保留時(shí)間約為5.8min。
7.5空白試驗(yàn)
除不加試樣外,按7.2~7.4步驟進(jìn)行。
8.結(jié)果計(jì)算與表述
根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)工作液和樣品液的峰高,按式(1)計(jì)算樣品中呋喃唑酮?dú)埩袅浚海╤-h0)×V×1000
C=Cs×···································(1)
hs×m
式中:
C──樣品中呋喃唑酮?dú)埩袅浚瑔挝粸槲⒖嗣壳Э耍?mu;g/kg);
h──樣品液中呋喃唑酮的峰高;
hs──標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中呋喃唑酮的峰高;
h0──空白試驗(yàn)的峰高;
Cs──標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中呋喃唑酮的濃度,單位為微克每毫升(μg/mL);
V──樣品液zui終定容體積,單位為毫升(mL);
m──樣品的稱取量,單位為克(g)。
9.線性范圍、檢測(cè)限、回收率
9.1線性范圍
本方法的呋喃唑酮標(biāo)準(zhǔn)工作液線性范圍為0.01μg/mL~1.00μg/mL。
9.2檢測(cè)限
本方法的檢測(cè)限為1μg/kg。
9.3回收率
本方法回收率為72.8%~96.2%。

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