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二手液相 島津液相色譜儀的日常應(yīng)用維護(hù)
2012-06-01 [4251]

二手液相 島津液相色譜儀的日常應(yīng)用維護(hù)

一 、島津掖相色譜儀的日常分析注意事項
1.關(guān)于試劑
試劑類別:有機(jī)溶劑 無機(jī)化合物 水
試劑的要求:(1)有機(jī)溶劑的級別HPLC以上試劑。
(2)無機(jī)化合物要求分析純以上。
(3) 水要求是去離子純凈水。
2.流動相
要求: (1)無氣泡,通過超聲脫氣,通氦氣等方法進(jìn)行脫氣。
(2)純凈無雜質(zhì),常用方法為用0.45微孔過濾膜進(jìn)行過濾。
3. ODS柱的注意事項
(1) 壓力 注意每根柱的耐壓(zui大使用壓力)。
(2) PH的范圍 不同柱子的PH值范圍有所不同。
(3) 清洗 柱子需要必要的清洗,請用戶參考柱子的說明書。
(4) 保存 長時間不使用柱子時需要合適的試劑進(jìn)行保存,請參考柱子的說明書。
4. 樣品的注入方式及進(jìn)樣量
(1)注入方式 在INJ位置將進(jìn)樣針插入,然后再將手柄扳到Load位,在Load位時將樣品勻速推入定量環(huán),在從Load位扳到INJ位置即完成進(jìn)樣過程。
(2)進(jìn)樣量 對于20微升定量環(huán),進(jìn)樣量20微升以下,5微升以上可用微量注射針進(jìn)樣(看刻度)。5微升以下可能回會造成樣品重復(fù)性變差。20 微升以上(利用定量環(huán))建議用戶注射量為定量環(huán)的3倍以上,即大于60微升。
以上建議主要是減少進(jìn)樣誤差,提高重復(fù)性。
5. 檢測器的背壓及各種檢測池的耐壓
(1)紫外檢測器 耐壓< 30kg/cm2f
(2)檢測器熒光 耐壓< 30kg/cm2f
(3)示差檢測器 耐壓< 30kg/cm2f
檢測器后面加一些背壓主要目的是防止氣泡滯留在檢測器中。

二、液相色譜的常見故障及排除方式
1、        關(guān)于吸濾過濾器堵塞
現(xiàn)象: 塞吸現(xiàn)象、管路中不斷產(chǎn)生氣泡
處理方式:將吸濾頭1從溶劑管中拔出,放在正己烷
或稀硝酸(一般<10%)中超聲清洗。
2、        在線過濾器堵
現(xiàn)象: 不連接柱子及管路、混合器(松開泵進(jìn)混合器或柱子的管路接頭),設(shè)定泵流速為1ml/min,泵壓力大于0.3MPa,說明在線過濾器堵。
處理方式: 一般建議用戶更換新的過濾器,儀器型號:LC-10ADVP, LC-10ATVP, LC-20A,LC-20AD, LC-10AT, LC-8A, LC-6AD等可以將在線過濾器拆下,用稀硝酸(濃度小于10%),進(jìn)行超聲清洗。
3、        壓力波動的原因及處理方法
產(chǎn)生波動的原因: 有氣泡
密封圈有磨損,產(chǎn)生微量的泄液
進(jìn)口單向閥中有異物(較常見)
在線過濾器,管路,柱子進(jìn)口處有鹽析出或雜物
處理方法: 流動相進(jìn)行脫氣,排除流路中的氣泡
更換密封圈
清洗進(jìn)出口單向閥,將單向閥置于燒杯中,用異丙醇進(jìn)行超聲清洗
檢查并清洗過濾器及流路
4、        混合器堵及解決方法
雙泵高壓梯度系統(tǒng)有高壓混合器,長時間使用后會產(chǎn)生不同程度的內(nèi)部過濾器堵。
處理方法:
(1)先把混合器的預(yù)混合腔整體拆下,再拆下1號和2號處。
(2)建議用戶不可拆開2號和3號之間的連接。
(3)取出混合器內(nèi)部的過濾器5-1。
(4)將過濾器置于稀硝酸中進(jìn)行超聲清洗。
5、引起柱壓升高的原因
色譜柱長時間使用后用戶發(fā)現(xiàn)柱壓比以往要高出許多,造成此情況可能由以下幾個因素引起。
(1)        在線過濾器堵。
(2)        高壓混合器堵。
(3)        進(jìn)樣器堵。
(4)        流路中部分細(xì)管堵。
(5)        流通池堵
(6)        柱子內(nèi)部吸附樣品產(chǎn)生堵
確認(rèn)發(fā)法:進(jìn)行分段檢測,確認(rèn)的確是柱子壓力高還是以上5點(diǎn)原因中某個引起的。
6、進(jìn)樣峰分叉的原因
A)        流路及柱子等沒有做任何改變的情況下,分析樣品時,被檢測峰產(chǎn)生分叉,則說明保護(hù)柱或分析柱柱效下降,需再生保護(hù)柱或分析柱。
B)        柱的出口到檢測池的管路偏長或管路內(nèi)徑寬所致(常用內(nèi)徑0.3mm以下),導(dǎo)致樣品擴(kuò)散,造成峰分叉。
7、        什么情況下需更換D2 Lamp
A)        在SPD-10A, SPD-10Avp,SPD-20A上查看參比池的能量,若能量值(REF EN )偏低(220nm時),一般在400以下,則被認(rèn)為需要更換氘燈。
B)        顯示D2 Lamp ERROR時,一般情況下認(rèn)為氘燈不良需更換。
C)        氘燈超過使用時間(zui多2000小時),需要更換氘燈。
8、        造成檢測池能量低的原因
A.        氘燈使用時間過長(大于2000小時),燈老化所致
B.        光路系統(tǒng)受到污染或老化
說明:檢測池能量高低以參比池為準(zhǔn)。
9、        檢測池中有氣泡如何排除
1一般情況下,很小的氣泡會停留在檢測池中,所以需要在池管路出口1處加一個背壓管,池中氣泡不易在池中產(chǎn)生。(加背壓:出口處加上一段阻尼管增加壓力)

10、        如何清洗流通池
一般情況下,請用戶不要將池拆散,而是用儀器附帶的工具進(jìn)行清洗。 常用流程:水-----甲醇-----異丙醇-----甲醇,或再用稀硝酸沖洗池流路。
11、        基線漂移,噪音增大的原因。
1、        所用試劑不純
2、        整個流路系統(tǒng)不干凈
3、        流動池污染
4、        氘燈使用時間過長
5、        電壓不穩(wěn),或者有環(huán)境干擾
6、        柱子污染等因素
12、        梯度洗脫時可能產(chǎn)生的干擾峰
在進(jìn)行梯度洗脫時,由于溶劑的變化,導(dǎo)致吸光度背景值的該改變。所以會產(chǎn)生基線上下波動,這是正?,F(xiàn)象。由于不斷的洗脫。特別是水及無機(jī)鹽混合的流路,流過柱子后部分雜質(zhì)被柱子吸附,隨著體系洗脫液極性的變化,以及在不同的檢測波長下,某些成分被檢測,導(dǎo)致在沒有進(jìn)樣情況下,基線上出現(xiàn)峰,即被認(rèn)為干擾峰。
13、        ODS柱的再生
ODS柱子使用一段時間后可能會導(dǎo)致柱效下降,此時需要對柱子進(jìn)行再生,提高柱效。
1.        甲醇沖洗半小時
2.        三氯甲烷沖洗十分鐘
3.        異丙醇沖洗十分鐘
4.        三氯甲烷沖洗十分鐘
5.        甲醇沖洗半小時
說明:柱使用時間的長短與被分離的樣品有很大的關(guān)聯(lián),所以碰到像生物樣品、血制品、發(fā)酵產(chǎn)品等中均含有不同程度的蛋白質(zhì)及大分子量的組分,柱子很容易損壞,柱效易下降。這種情況下用以上方式進(jìn)行再生幾乎沒有明顯的改變。
 

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